Obsah:

Ako zistíte koncentráciu DNA z absorbancie?
Ako zistíte koncentráciu DNA z absorbancie?

Video: Ako zistíte koncentráciu DNA z absorbancie?

Video: Ako zistíte koncentráciu DNA z absorbancie?
Video: Motivačný príbeh | TIP ako sa učiť rýchlejšie! 📖 2024, November
Anonim

koncentrácia DNA sa odhaduje meraním absorbancia pri 260 nm, úpravou A260 meranie zákalu (merané pomocou absorbancia pri 320 nm), vynásobením faktorom riedenia a použitím vzťahu, že A260 1,0 = 50 ug/ml čistej dsDNA.

Podobne sa ľudia pýtajú, ako zistíte koncentráciu DNA?

Na určenie koncentrácie DNA v pôvodnej vzorke vykonajte nasledujúci výpočet:

  1. Koncentrácia dsDNA = 50 ug/ml x OD260 × faktor riedenia.
  2. Koncentrácia dsDNA = 50 μg/ml × 0,65 × 50.
  3. Koncentrácia dsDNA = 1,63 mg/ml.

Tiež, čo je dobrá koncentrácia DNA? A dobre kvalitu DNA vzorka by mala mať A260/A280 pomer 1,7-2,0 a A260/A230 pomer väčší ako 1,5, ale keďže citlivosť rôznych techník na tieto kontaminanty sa líši, tieto hodnoty by ste mali brať len ako vodítko pre čistotu vašej vzorky.

Týmto spôsobom absorbuje DNA pri 280 nm?

Pomer absorbancie pri 260 nm vs 280 nm je bežne používané na hodnotenie DNA kontaminácia bielkovinových roztokov, pretože bielkoviny (najmä aromatické aminokyseliny) absorbovať svetlo pri 280 nm.

Ako používate NanoDrop na koncentráciu DNA?

V podstate nanokvapka vám dáva možnosť výberu DNA , RNA, proteíny. Treba si vybrať DNA , potom vložte 2 ΜL vody (preferenčne mili Q), zvoľte "Prázdne" potom vložte ďalšie 2 ΜL vody, aby ste potvrdili, že miera je 0. Potom vložte 2 ΜL vašej vzorky. Dostanete meranie.

Odporúča: