Prečo musí byť spektrofotometer nastavený na určitú vlnovú dĺžku?
Prečo musí byť spektrofotometer nastavený na určitú vlnovú dĺžku?

Video: Prečo musí byť spektrofotometer nastavený na určitú vlnovú dĺžku?

Video: Prečo musí byť spektrofotometer nastavený na určitú vlnovú dĺžku?
Video: Spectrophotometer: Wavelengths 2024, November
Anonim

Keď upravíte vlnová dĺžka na a spektrofotometer , vy sú zmena polohy hranola alebo difrakčnej mriežky tak, že rôzne vlnové dĺžky svetla sú nasmerovaný na štrbinu. Čím menšia je šírka štrbiny, tým lepšia je schopnosť prístroja rozlíšiť rôzne zlúčeniny.

Z toho na akú vlnovú dĺžku bude spektrofotometer nastavený?

V závislosti od rozsahu vlnovej dĺžky svetelného zdroja ho možno rozdeliť do dvoch rôznych typov: UV-viditeľný spektrofotometer: využíva svetlo v ultrafialovom rozsahu (185 - 400 nm) a vo viditeľnom rozsahu (400 - 700 nm ) spektra elektromagnetického žiarenia.

Podobne, prečo potrebujete kalibrovať spektrometer zakaždým, keď zmeníte vlnovú dĺžku? Spektrofotometer musí byť kalibrovaný proti slepému roztoku tak že merania potom môžu použiť absorbanciu slepého roztoku ako nulovú referenciu. Miera schopnosti látky absorbovať špecifikované svetlo vlnová dĺžka.

pri akej vlnovej dĺžke by sa mali odčítať?

Vezmite čítania v 5 nm intervaloch trochu pred a po tomto vlnová dĺžka . Napríklad, ak bola maximálna absorbancia nájdená pri 450 nm, potom sa získa presnejšia čítanie λmax, vezmite absorbanciu čítania pri 440, 445, 455 a 460 nm.

Prečo meriate absorbanciu roztoku pri 550 nm?

Proteíny reagujú s iónmi medi v alkalickom prostredí Riešenie aby sa vytvoril fialovo sfarbený komplex, ktorý absorbuje svetlo pri 550 nm . Preto tým meranie koncentrácia komplexu s použitím A550 ( Absorbancia pri 550 nm ), vy sú tiež meranie koncentrácia bielkovín.

Odporúča: