Obsah:

Ako načítate gélovú elektroforézu?
Ako načítate gélovú elektroforézu?

Video: Ako načítate gélovú elektroforézu?

Video: Ako načítate gélovú elektroforézu?
Video: Akon - Right Now (Na Na Na) (Official Video) 2024, Apríl
Anonim

Vloženie vzoriek a spustenie agarózového gélu:

  1. Pridať načítava pufru do každej vzorky DNA.
  2. Po stuhnutí položte agarózu gél do gél krabica ( elektroforéza jednotka).
  3. Vyplňte gél box s 1xTAE (alebo TBE) až do gél je pokrytý.
  4. Opatrne naložiť rebrík molekulovej hmotnosti do prvého pruhu gél .

Vzhľadom na to, koľko DNA potrebujete načítať na gélovú elektroforézu?

Množstvo DNA na načítanie na jamku je variabilná. Najmenšie množstvo DNA ktoré možno detegovať etídiumbromidom je 10 ng. DNA množstvá až 100 ng na jamku budú mať za následok ostrý, čistý pás na farbenom etídiumbromidom gél.

Navyše, prečo sa pri gélovej elektroforéze používa namiesto vody pufor? The vyrovnávacia pamäť je potrebný na udržanie pH roztoku DNA na takmer neutrálnej úrovni, pretože ak sa môže stať kyslým prostredníctvom elektrolýzy. Môžu spôsobiť elektrické prúdy spôsobené elektródami voda molekuly disociovať a uvoľňovať ióny H+.

Ľudia sa tiež pýtajú, prečo sa pri gélovej elektroforéze používa marker?

Menšie úlomky sa pohybujú rýchlejšie, a teda ďalej, ako väčšie úlomky, keď sa predierajú hadicou gél . Prečo sa používa značka pri prechode fragmentov cez gél ? A marker obsahuje fragmenty DNA známej veľkosti. Markery sú prevádzkované v každom gél na porovnanie s neznámymi fragmentmi v iných gél pruhy.

Koľko DNA je možné vidieť na agarózovom géli?

Väčšina agarózové gély sú vyrobené medzi 0,7 % a 2 %. A 0,7 % gél bude vykazujú dobré oddelenie (rozlíšenie) veľkých DNA fragmenty (5–10 kb) a 2 % gél bude vykazujú dobré rozlíšenie pre malé fragmenty (0,2–1 kb).

Odporúča: