Existujú iné metódy na purifikáciu produktov PCR?
Existujú iné metódy na purifikáciu produktov PCR?
Anonim

Pre aplikácie, ktoré vyžadujú PCR vyčistenie alebo overenie PCR výsledky, tam sú dve metódy všeobecne sa dodržiavalo: PCR produkt izolácia pomocou kolóny a gélu čistenie z agarózového gélu.

Aký typ chromatografie sa používa na čistenie produktov PCR?

Na čistenie produktov PCR sa používa vylučovacia chromatografia. To zachytáva malé molekuly, ako sú bielkoviny, primery a nukleotidy, zatiaľ čo veľké molekuly, ako sú produkty PCR, sú príliš veľké na to, aby vstúpili do guľôčok a prešli cez kolónu do odberových skúmaviek.

Tiež, ako čistíte DNA? V podstate môžete očistiť tvoj DNA vzorky lýzou vzoriek vašich buniek a/alebo tkanív pomocou najvhodnejšieho postupu (mechanické rozrušenie, chemické ošetrenie alebo enzymatické štiepenie), izoláciou nukleových kyselín od ich kontaminantov a ich vyzrážaním vo vhodnom tlmivom roztoku.

Okrem toho, prečo čistíme produkt PCR?

Prečistenie DNA z a PCR Reakcia je typicky nevyhnutná pre následné použitie a uľahčuje odstránenie enzýmov, nukleotidov, primerov a zložiek pufra. Bežne používané metódy využívajú rotačné kolóny obsahujúce silikagélovú matricu, na ktorú sa môže selektívne viazať DNA v prítomnosti chaotropných solí.

Prečo sa musí DNA čistiť?

my čisté hore DNA z vodných roztokov na odstránenie tlmivých solí, enzýmov alebo iných látok, ktoré by mohli ovplyvniť následné aplikácie. Príklady zahŕňajú PCR reakciu čisté hore, čisté až po obmedzení trávi a čisté genómu alebo plazmidu DNA kontaminované bunkovými proteínmi/úlomkami.

Odporúča: